市場(chǎng)上眾多膜材林林總總,如何根據(jù)自己的應(yīng)用需求來進(jìn)行膜材的選擇,對(duì)一個(gè)科研工作者來說并非易事。例如在LCMS中針頭濾器該如何選擇,在未知溶劑情況下該如何選擇膜材,有沒有能包打天下的萬能膜等等,都在日常實(shí)驗(yàn)工作中困擾著實(shí)驗(yàn)人員。今天生物通帶您來庖丁解牛,從核心的膜材入手,了解了膜材的性能和材質(zhì),選擇起來自然得心應(yīng)手。
隨著現(xiàn)代生命科學(xué)研究的深入,實(shí)驗(yàn)樣品過濾這一環(huán)節(jié)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中的作用越來越重要,然而市場(chǎng)上眾多膜材林林總總,如何根據(jù)自己的應(yīng)用需求來進(jìn)行膜材的選擇,對(duì)一個(gè)科研工作者來說并非易事。例如在LCMS中針頭濾器該如何選擇,在未知溶劑情況下該如何選擇膜材,有沒有能包打天下的萬能膜等等,都在日常實(shí)驗(yàn)工作中困擾著實(shí)驗(yàn)人員。今天生物通帶您來庖丁解牛,從核心的膜材入手,了解了膜材的性能和材質(zhì),選擇起來自然得心應(yīng)手。
通常,我們?cè)诟鶕?jù)應(yīng)用挑選產(chǎn)品時(shí)會(huì)關(guān)注幾個(gè)重要參數(shù)。關(guān)鍵的考察因素有樣品處理量和適用膜材。這里我們重點(diǎn)探討如何挑選合適的膜材。膜材是過濾產(chǎn)品中的“活性”部分,或者說是產(chǎn)品發(fā)揮作用的部分。理解膜材的特性可以幫助我們選擇zuihe合的濾材。
以下是市場(chǎng)上常用膜材的綜述。
親水濾膜材質(zhì)
親水性聚丙烯(GHP)膜
GHP膜是一種“萬能”膜,它是頗爾公司的專利技術(shù),應(yīng)用十分廣泛。它的親水特性使其既可以應(yīng)用于水溶液過濾,也可以應(yīng)用于有機(jī)溶液過濾。這種聚丙烯膜具有強(qiáng)大的化學(xué)兼容性,在環(huán)境檢測(cè)和需要接觸有機(jī)溶劑的應(yīng)用中使用較為普遍。GHP膜的性能已經(jīng)在HPLC(高效液相色譜)的應(yīng)用中得到了測(cè)試和驗(yàn)證,這種膜在使用中不會(huì)有溶出物造成對(duì)檢測(cè)樣品的污染。這種特性也消除了膜的溶出物對(duì)樣品造成污染的可能性。
GHP膜的自身熒光值非常低,因此在分辨熒光檢測(cè)應(yīng)用中不會(huì)增加背景“噪音”。GHP也是一種非吸附膜,可以防止目標(biāo)分子的非特異性結(jié)合。GHP膜有0.2μm和0.45μm兩種孔徑可供選擇。
GHP膜的適用范圍包括:
• 需要使用強(qiáng)有機(jī)溶劑
• 高通量篩選
• 受體:配體篩選
• 化合物文庫篩選
• 高效液相色譜樣品制備
• 剪切反應(yīng)
• 代謝研究
• 常規(guī)樣品制備
Supor?膜(親水聚醚砜)
Supor和Supor MachV膜是一種低蛋白吸附聚醚砜(PES)膜,專門針對(duì)生物、制藥行業(yè)和除菌過濾需求而進(jìn)行了優(yōu)化。Supor膜具有低蛋白結(jié)合特性,是微量樣品回收的不錯(cuò)的選擇。Supor膜具有廣泛的藥物兼容性和適度的化學(xué)耐性/兼容性。Supor膜的特性包括:高流速、高通量;低蛋白吸附;可高溫高壓滅菌;低溶出物;以及高度一致性。Supor膜有0.1μm、0.2μm、0.45μm、0.8μm和1.2μm孔徑可供選擇。
Supor膜的適用范圍包括:
• 新生兒代謝疾病的篩檢
• 基于微球/樹脂的應(yīng)用
• 受體:配體分析
• 裂解物澄清
• 常規(guī)樣品制備
尼龍膜
尼龍膜具有廣泛的適用范圍,目前來說市場(chǎng)上以頗爾公司尼龍膜為標(biāo)準(zhǔn)。尼龍膜可通過改性和修飾來優(yōu)化膜的等級(jí),用于高或低吸附能力,環(huán)境大氣監(jiān)測(cè),甚至是化學(xué)分析樣品制備。Biodyne?尼龍轉(zhuǎn)印膜是專為生物分子結(jié)合而優(yōu)化設(shè)計(jì)的產(chǎn)品,適合于放射和非放射檢測(cè)系統(tǒng)。Bio-Inert?膜是一種低吸附膜,比傳統(tǒng)的尼龍轉(zhuǎn)印膜吸附率要低25-50倍。Nylasorb™膜是一種酸雨檢測(cè)膜,同時(shí)也是一種潔凈膜,非常適用于高效液相色譜分析前的分析樣品制備。尼龍膜有0.2μm、0.45μm、1μm和1.2 μm孔徑可供選擇。
尼龍膜的適用范圍包括:
• 樣品制備
• 環(huán)境監(jiān)測(cè):用于酸沉降
• 基于微珠的分析
• 藥物結(jié)合研究
• 丙烯酰胺凝膠中核酸樣本的回收
疏水濾膜材質(zhì)
PTFE膜(以聚丙烯為支持層的疏水性PTFE)
PTFE膜是一種疏水性材質(zhì)的膜,可以應(yīng)用于多種常規(guī)樣品制備和過濾。當(dāng)需要膜材表現(xiàn)出疏水特性,阻止水分流過而允許空氣或氣體濾過時(shí),就可以選用PTFE膜。PTFE膜在濾過氣體方面有著廣泛的應(yīng)用。在“濕透”之前,該膜不會(huì)允許液體濾過。PTFE對(duì)被動(dòng)流體表現(xiàn)出優(yōu)秀的阻攔效應(yīng),這非常適用于需要孵化步驟的過濾。PTFE膜有0.2μm、0.45μm和1 μm孔徑可供選擇。
PTFE膜的適用范圍包括:
• 分子合成反應(yīng)
• 藥物合成反應(yīng)
• 有機(jī)樣品制備
• 發(fā)酵罐和發(fā)酵桶的通風(fēng)
預(yù)過濾濾膜材質(zhì)
預(yù)過濾濾膜/Supor?膜
有多種適合于作為Supor膜的預(yù)過濾步驟的濾膜可用來增加濾液流速并為澄清實(shí)驗(yàn)去除顆粒。預(yù)過濾濾膜的孔徑較大,有助于去除顆粒和細(xì)胞碎片。Supor膜具有與前述相同的非吸附特性。預(yù)過濾濾膜/Supor膜有許多不同種配置可供選擇。
Supor膜預(yù)過濾膜材質(zhì)適用范圍包括:
• 細(xì)胞裂解液的澄清
• 質(zhì)粒制備
• 飽含顆粒樣品的制備
• 蛋白質(zhì)溶液的制備
分子分離(超濾)濾膜材質(zhì)
Omega™超濾膜(改性聚醚砜)
Omega超濾膜是一種專為降低蛋白質(zhì)和核酸吸附性而經(jīng)過改性修飾的聚醚砜膜。Omega膜依據(jù)分子排阻原理,將樣品按分子量的不同予以分離。分子排阻作用可通過選擇合適的截留分子量(MWCO)的膜來將大小分子分離,然后通過真空或者離心過濾來分離樣品。對(duì)膜進(jìn)行改性可以防止生物分子吸附到膜上,并方便在膜表面濃縮較大分子。Omega膜的低吸附性賦予其諸多優(yōu)點(diǎn),包括對(duì)低濃度生物分子的高回收率和更低的表面污染,后者可能會(huì)減弱膜的截留性。通常,選擇合適的截留分子量與選擇合適的離心濃縮產(chǎn)品的原則是一致的。膜的截留分子量應(yīng)該為所截留生物分子分子量的1/6-1/3。舉例來說,如果要截留的蛋白質(zhì)的分子量是60K,則應(yīng)選擇截留分子量為10K的膜。可供選擇的膜截留分子量包括1K、3K、5K、10K、30K、50K、100K和300K。
Omega膜的適用范圍包括:
• 肽、蛋白質(zhì)、寡核苷酸、DNA和RNA的濃縮、純化和脫鹽
• 標(biāo)記反應(yīng)和PCR反應(yīng)的回收
• 從瓊脂糖凝膠中分離DNA
• 分子排阻層析
生物分子結(jié)合的濾膜材質(zhì)
以聚丙烯為支持層的玻璃纖維膜
在AcroPrep™濾板中使用玻璃纖維為去除樣品中的顆粒物質(zhì)并保持樣品的完整性提供了一種經(jīng)濟(jì)可行的解決方案。這對(duì)于低成本、粗樣品的制備是一個(gè)不錯(cuò)的選擇。該玻璃纖維由無粘和劑硼硅酸鹽玻璃制成,不會(huì)造成雜質(zhì)的溶出而污染樣品。玻璃纖維膜有聚丙烯層做支持。該支持層不會(huì)有溶出物,并且可以防止玻璃纖維脫落到樣品中??晒┻x擇的孔徑規(guī)格包括1.0μm和3.0μm。
玻璃纖維濾膜適用范圍包括:
• 基于細(xì)胞的分析
• 粗分級(jí)分離
• 受體:配體結(jié)合分析
• DNA結(jié)合
• 質(zhì)粒DNA抽提
Mustang? Q陰離子交換膜
Mustang Q膜擁有*的陰離子交換能力,它是頗爾公司的專利產(chǎn)品。這種膜處理樣品流速快,并且不影響結(jié)合和回收,其每孔的結(jié)合能力可以達(dá)到0.38mg牛血清白蛋白/孔。Mustang Q膜有用于濾板和針頭式過濾器兩種產(chǎn)品形式。
Mustang Q的適用范圍包括:
• 病毒顆粒的去除
• 帶有負(fù)電荷蛋白的結(jié)合和洗脫
• DNA 純化
Mustang? S陽離子交換膜
Mustang S膜擁有*的陽離子交換能力,它也是頗爾公司的專利產(chǎn)品。這種膜處理樣品流速快,并且不影響結(jié)合和回收,其每孔的吸附能力可以達(dá)到0.29mg溶菌酶/孔。Mustang S膜有用于濾板和針頭式過濾器兩種產(chǎn)品形式。
Mustang S膜的適用范圍包括:
• 激酶檢測(cè)
• 正電荷蛋白的結(jié)合和洗脫
BioTrace™ NT(純硝酸纖維素)膜
BioTrace™ NT膜,孔徑0.2μm,是100%純硝酸纖維素膜,具有良好的耐用性,并對(duì)蛋白質(zhì)與核酸較高的結(jié)合能力。BioTraceNT膜的結(jié)合作用是基于其疏水作用和靜電作用,這一點(diǎn)使其非常適用于蛋白質(zhì)和核酸的斑點(diǎn)雜交。BioTrace NT膜應(yīng)用廣泛,可以用于化學(xué)發(fā)光、熒光、比色和放射性同位素檢測(cè)。
BioTrace NT膜的適用范圍包括:
• 核酸轉(zhuǎn)印和檢測(cè)
• 固相ELISA(酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè))
• 放射性免疫檢測(cè)
• 熒光或者化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
BioTrace PVDF(聚偏二氟乙烯)膜
BioTrace PVDF膜用途廣泛,可以用于核酸和蛋白質(zhì)的結(jié)合。該膜孔徑為0.45μm,對(duì)常用溶劑具有廣泛的兼容性。BioTrace PVDF膜在用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)時(shí)背景值非常低。它在使用過程中不會(huì)褪色,并且持久耐用。
BioTrace PVDF膜的結(jié)合反應(yīng)是疏水性的,并且生物分子可以通過紫外交聯(lián)和堿基固定的方法固定化在膜上。由于BioTrace PVDF膜不易褪色,因此其非常適用于顯色反應(yīng)的檢測(cè)。
BioTrace PVDF膜的適用范圍包括:
• 蛋白質(zhì):核酸相互作用研究
• 免疫印跡
• 固相ELISA(酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè))
• 放射性免疫檢測(cè)
• 熒光或者化學(xué)發(fā)光檢測(cè)
• 使用結(jié)合的生物分子做藥物的研發(fā)
• 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)EliSpots
俗話說好的實(shí)驗(yàn)取決于好的樣品,好的樣品取決于好的過濾,好的過濾取決于選對(duì)膜材,在聽了編者的介紹后,相信您的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成功了一半,總而言之,隨著材料技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展,過濾技術(shù)會(huì)對(duì)我們的生活和工作起著越來越重要的作用。
以下為實(shí)驗(yàn)室用的換膜過濾器
實(shí)驗(yàn)室真空過濾系統(tǒng) :
Lafil 300 - LF 30 * Lafil 300 真空過濾主機(jī) | Lafil 400 - LF 30 * Lafil 400 真空過濾主機(jī) |
Lafil 300 - SF 10 (LF 32) * Lafil 300 真空過濾主機(jī)
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Lafil 400 - SF 10 (LF 32) * Lafil 400 真空過濾主機(jī)
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Rocker 300 - LF 30 * Rocker 300 無油式真空幫浦 | Rocker 300 - LF 30 - SS * Rocker 300 無油式真空幫浦 |
Rocker 300 - MF 31 * Rocker 300 無油式真空幫浦 | Rocker 300 - SF 10 (LF 32) * Rocker 300 無油式真空幫浦 |
Rocker 300 - LF 31 * Rocker 300 無油式真空幫浦 |
實(shí)驗(yàn)室溶劑純化裝置 :
* Rocker 300C | Chemker 300- VF 12 * Chemker 300 耐腐蝕真空幫浦 |
* Lafil 300C |
多聯(lián)過濾座 :
* 3 孔不銹鋼多孔過濾座 | M*c 600-MS * 6 孔不銹鋼多孔過濾座 |
* 3 孔旋卡式不銹鋼過濾座 | M*c 600-MB * 6 孔旋卡式不銹鋼過濾座 |
* 3 孔旋卡式不銹鋼過濾座 |
* 6 孔旋卡式不銹鋼過濾座 |
* 3 孔鋁制多孔過濾座 |
* 6 孔鋁制多孔過濾座 |
多聯(lián)真空過濾系統(tǒng) :
M*c 301-MB-A * Alligator 200 隔膜式抽水真空泵 |
* Alligator 200 隔膜式抽水真空泵
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M*c 310-MS-A * Alligator 200 隔膜式抽水真空泵 |
* Alligator 200 隔膜式抽水真空泵
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M*c 301-MB-T * Rocker 400 無油式真空幫浦 |
* Rocker 400 無油式真空幫浦
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* Rocker 400 無油式真空幫浦 | M*c 610-MS-T * Rocker 400 無油式真空幫浦 |
直接排水式真空過濾系統(tǒng) :
WaterVac 100-MS 系列
WaterVac 100-MB 系列
WaterVac 100 拋棄式漏斗 系列
WaterVac 200-MB * 旋卡式 | WaterVac 201-MB * 旋卡式,含2個(gè)SF, 100 ml不銹鋼過濾杯 |
WaterVac 200-MS * 硅膠塞式 |